盐酸副品红与亚硝酸钠反应生成六偶氮副品红（重氮盐），底物α-醋酸萘酚在酯酶的作用下，分解产生α-萘酚，α-萘酚与六偶氮副品红生成棕红色沉淀，定位于细胞浆中，本染色液对酯酶染色无特异性，故又称为非特异性酯酶染色。